Flowcytometry là chuyên môn có tác dụng đo được những đặc tính huỳnh quang cùng quang quẻ họccủa một tế bào đối chọi hoặc các hạt nlỗi vi sinch vật, nhân cùng lây nhiễm sắc thể được chuẩnbị trong dung dịch lỏng lúc chúng đi qua một mối cung cấp sáng sủa. Các sản phẩm công nghệ flow cytometrytrước tiên là một trong thứ đơn thông số (single-parameter) chỉ được áp dụng đểphát hiện kích thước của tế bào. Trong thời điểm này, các lắp thêm với độ phức hợp cao cókhả năng vạc hiện nay mặt khác 14 thông số kỹ thuật đang được phát triển. Ngulặng tắc cơ bảncủa kỹ thuật này tương quan tới ánh sáng tán xạ với ánh nắng huỳnh quang quẻ phân phát ra,được tạo thành bởi vì nguồn sáng sủa kích say đắm (hay là chùm tia laze). Các thông sốchiếm được rất có thể là thông báo quý giá về những tinh tướng hóa sinc, sinh lý và phântử của phân tử. Ánh sáng sủa tán xạ vào nghệ thuật có tương quan trực tiếp cho tới các đặcđiểm cấu tạo và sắc thái học của tế bào, trong những lúc kia, ánh nắng huỳnh quangbao gồm xuất phát tự những đầu dò khắc ghi huỳnh quang quẻ, tỉ trọng thuận với lượng đầu dòhuỳnh quang đã tích hợp tế bào với các thành bên trong tế bào. Có hai nhiều loại flowcytometry không giống nhau là non-sorting (ko phân loại) và sorting (phân loại).

Bạn đang xem: Flow cytometry là gì

FASC (Flourescent activated cell sorters) là những máy đếm tế bào theo chiếc chảycó công dụng phân các loại các gắng bào được đánh dấu huỳnh quang quẻ từ 1 các thành phần hỗn hợp cácquần thể tế bào.
Đầu tiên, các phân tử sẽ tiến hành mang tới đèn tia laze vào mộtchiếc hóa học lỏng. Bất kỳ hạt kết hợp hoặc tế bào nào bao gồm form size từ 0.2-150 µmđầy đủ phù hợp; các tế bào từ các mô rắn phải được vứt bỏ trước lúc so sánh.khi các phân tử đi qua tia tia laze, bọn chúng tán xạ tia nắng Laser, ánh nắng tán xạ và ánhsáng sủa huỳnh quang đãng sẽ tiến hành thu trên thấu kính trên địa điểm tương thích. Sự phối hợp giữaphần tử bóc tách chùm tia cùng các kính thanh lọc đã hướng tia nắng tán xạ và ánh nắng huỳnhquang đãng tới detector; sau cùng các detector sẽ khởi tạo ra tín hiệu điện tỉ lệ thành phần thuậnvới tín hiệu quang quẻ học tập.
Cácnguyên tố thiết yếu của dòng sản phẩm flow cytometer (đếm tế bào theo mẫu chảy) và cellsorter (phân các loại tế bào) bao gồm: hệ dung dịch, hệ thống quang đãng học (ánh sángkích ưa thích và bộ thu ánh nắng kích thích), màng lưới điện (detector) và một máytính. Hệ thống dung dịch bao gồm trách rưới nhiệm điều phối loại dung dịch đựng các hạtcho tới mối cung cấp sáng sủa. Hệ thống quang đãng học tập kích say mê đã triệu tập nguồn sáng sủa cho tới những tếbào/ các hạt, còn khối hệ thống quang đãng học thu thừa nhận sẽ gửi những ánh nắng tán xạ hoặcánh sáng huỳnh quang cho tới màng lưới năng lượng điện tử. Mạng lưới điện sẽ phát hiện tín hiệuvới gửi những biểu lộ thành các công bố số tỉ trọng thuận cùng với cường độ ánh sángcùng máy tính sẽ so sánh những thông báo này.
Kỹthuật flow cytometry được áp dụng rộng rãi trong vô số áp dụng nhằm mục tiêu phát hiệncác kháng nguim màng, tế bào hóa học với nhân. Hình như, toàn cục tế bào cùng các thànhphần tế bào nlỗi bào quan liêu, nhân, DNA, RNA, lây lan sắc đẹp thể, cytokines, hooc môn vàprotein rất có thể được phạt hiện thông qua chuyên môn này. Việc so sánh những quátrình vào tế bào cùng quy trình tế bào nhờ Việc đo lượng calcium cùng năng lượng điện thếmàng cũng là một trong trong các ứng dụng của flow cytometry. Bài viết sau đây sẽtrình diễn kỹ rộng về những thành phần của một thứ flow cytometry.
Hệthống hỗn hợp gồm phương châm tải những tế bào trong một hỗn hợp đi qua thiếtbị nhằm chiếm được các tài liệu, hệ thống này bao gồm 2 thành phần: sheath fluid (dòngdung dịch bảo vệ/ chiếc hỗn hợp bên ngoài) cùng pressurized line (dòng áp suất).Sheath fluid là 1 dung dịch trộn loãng (thông thường là đệm PBS- phosphate-bufferedsaline), được tiêm vào buồng flow nằm tại vị trí trung trung tâm của vật dụng bởi vì dòng áp suất.Một áp suất không khí cũng khá được tiêm vào các tế bào đã có hòa hợp trong ống mẫuvào phía bên trong buồng flow. Dòng chủng loại sẽ tiến hành gửi vào lõi trung trọng tâm cơ mà xung quangđược coi là dòng hỗn hợp đảm bảo an toàn và vươn lên là loại lõi (core fluid- một cái khôn cùng bé chỉnhằm từng tế bào hoặc từng hạt đi qua), được tạo nên dựa trên sự biệt lập áp suấtthân loại hỗn hợp phía bên ngoài (sheath fluid) với loại chủng loại (sample fluid), trường đoản cú đógiúp triệu tập tế bào/phân tử bao gồm trong mẫu mã thành loại tế bào đơn nhằm trải qua chùm tiatia laze. Do kia, quá trình này có thể chấp nhận được thắp sáng đồng đông đảo từng tế bào bắt buộc được gọilà quy trình tập trung tbỏ động lực học tập (hydrodynamic focusing).

Xem thêm: Kỹ Năng Tin Học Văn Phòng Tiếng Anh Là Gì, Tin Học Văn Phòng Tiếng Anh Là Gì


*

Tỷlệ chuyển những tế bào vào chùm tia laze hoàn toàn có thể được thực hiện nhờ vào hệ thống thiết bị flowcytometer
dựa vào mục đích của phân tích. lấy một ví dụ, tỉ trọng chiếc chảy cao hay sửdụng mang lại câu hỏi đo lường và thống kê nlỗi immunophenotyping nghỉ ngơi tế bào động vật tất cả vú, trong khiđó, tỉ trọng dòng chảy phải chăng hay ưng ý hợp với các vận dụng yên cầu độ phân giảicao nhỏng đối chiếu nguyên tố DNA. Các thông số kỹ thuật đặc biệt cần thiết thu được nhờsự tiếp xúc những hạt với chùm tia Laser dựa vào vào hoạt động buổi tối ưu của các hệthống dung dịch. Do kia, cần được bảo đảm an toàn rằng không có sạn bong bóng khí cùng những mảnhvụn trong hệ thống này để áp lực đang đồng phần đa sống hồ hết thời hạn.
Hệthống quang học tập vào lắp thêm flow cytometry có tác dụng nhiệm vụ chiếu ánh nắng kích thíchbao gồm đèn Laser, thấu kính cùng thành phần thu ánh sáng. Thấu kính gồm phương châm địnhhình và triệu tập chùm tia laze. Ánh sáng laze được tạo nên bằng cách kích thíchcác năng lượng điện tử (electron) đã nghỉ ngơi trạng thái cơ phiên bản lên tinh thần kích đam mê có mứcnăng lượng cao nhờ năng lượng điện áp, sau một thời gian nđính thêm (thường xuyên là 10-7 –10-8 giây), các điện tử sẽ trsống về trạng thái cơ bản cùng phát ra nănglượng bên dưới dạng những photon ánh sáng. Sau Lúc Laser phản vào tế bào, phần đông ánhsáng bị chệch hướng đối với mặt đường tryền thẳng vị chạm mặt yêu cầu thứ hạn chế được Gọi làánh sáng tán xạ. Có nhì các loại ánh sáng tán xạ là forward scatter (FSC) cùng sidescatter (SSC). Các yếu tố ảnh hưởng đến sự tán xạ tia nắng là màng tế bào,nhân, các phân tử của tế bào, mẫu thiết kế với bề mặt tế bào. Nhìn chung kích cỡ củatế bào hoặc của một phân tử với độ phức tạp bên trong tế bào được sệt hiệu do loạitán xạ. Ánh sáng sủa FSC là kết quả của việc nhiễu xạ thu được dọc theo trục của chùmtia tới tia laze. FSC tỉ trọng cùng với diện tích mặt phẳng hoặc size tế bào cùng phù hợpđể phân phát hiện tại, tách biệt những phân tử về kích thước, hay áp dụng thịnh hành trongimmuophenotyping. Còn ánh nắng SSC bao hàm đa số các tia nắng khúc xạ với nhiễuxạ, được thu ở góc 90o so với chùm tia cho tới Laser. SSC tỉ lệ với thànhphần những hạt hoặc độ phức hợp bên phía trong tế bào. Trong khi, ánh sáng huỳnhquang gồm xuất phát từ bỏ kháng thể hoặc dye ghi lại huỳnh quang như là PI cũng đượcbức xạ trên và một góc cùng với SSC.
*

Hình 2: Ánh sáng tán xạ (lightscattering). FSC tỉ trọng với form size, trong khi kia SSC tỉ trọng cùng với những thành phầnvới độ phức hợp bên phía trong tế bào.
Cótương đối nhiều thông số kỹ thuật laze vào thứ flow cytometer dựa vào loại hóa học huỳnh quangđược kích mê say. Đèn argon laze (một đèn tia laze thông thường cùng với bước sóng kíchưa thích 488 nm) được sử dụng nhằm kích phù hợp nhiều dye tổng vừa lòng nlỗi fluoresceinisothiocyanate (FITC) và dye huỳnh quang tự nhiên và thoải mái như tảo với phytoplankton. Rấtnhững máy flow cytometer cùng sorter tất cả thêm đèn tia laze có khả năng kích ưng ý chấthuỳnh quang sinh hoạt bước sóng kích thích hợp làm việc dải sóng UV (300-400nm) hoặc red diodekích say mê chất huỳnh quang quẻ nghỉ ngơi dải sóng đỏ (630 nm).

Xem thêm: Doctrine Là Gì - Nghĩa Của Từ Doctrine Trong Tiếng Việt


Hệthống thu dấn ánh sáng tất cả thấu kính để thu tia nắng vạc ra trường đoản cú sự tương tácthân chùm tia laze cùng hạt; một khối hệ thống gương và kính thanh lọc nhằm bóc cùng tiếp nối hướngtia nắng gồm bước sóng đặc hiệu đến detector thích hợp.

Chuyên mục: KHÁI NIỆM LÀ GÌ
Bài viết liên quan

Trả lời

Email của bạn sẽ không được hiển thị công khai. Các trường bắt buộc được đánh dấu *